姚氏始祖于明嘉靖年间迁此定居，因村中有一条大道，西距鄢陵县二十里路，是过路客商宿店之所，得名二十里店。
2023年12月，二十店村被认定为第二批河南省乡村康养旅游示范村。
2022年1月，二十店村被命名定为2021年度河南省卫生村。
2017年11月，中央文明委决定授予二十店村第五届全国文明村镇称号。
二十店村是扶沟县韭园镇下辖的行政村，城乡分类代码为122，为镇乡结合区。区划代码为411621104220，居民身份证号码前6位为411621。邮政编码为466000，长途电话区号为394 ，车牌号码为豫P。二十店村与霍家村、太尉铺村、后杨村、谢岗村、田张靳村、李楼村、朱刘村、李集村、鲁家村、雁周村、十里店村、小王庄村、大王庄村、史老庄村相邻。历史沿革：清代属扶沟县黄甫地方。
民国年间属扶沟县西区（晋岗寺）。
1949年属扶沟县六区（李集）。
1958年设二十里店大队，属韭园公社。
1983年改为二十里店村民委员会，属韭园乡。
